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色谱柱的使用和维护注意事项_亚博网站提款秒到的

编辑:亚博网站信誉有保障 来源:亚博网站信誉有保障 创发布时间:2021-03-10阅读25705次
  本文摘要:色谱柱的精确用于和保证 十分最重要,稍不留神就不容易降低柱效、增加使用期乃至毁损。

色谱柱的精确用于和保证 十分最重要,稍不留神就不容易降低柱效、增加使用期乃至毁损。在色谱仪操作流程中,务必注意下述难题,以保证 色谱柱。

1、避免 工作压力和溫度的急遽转变及一切机械设备振动。溫度的突然转变或是使色谱柱从底处丢掉下都是会危害柱内的铺满情况;柱压的突然提高或降低也不会不理智柱内填料,因而在调整水流量时理应比较慢进行,在阀气相时阀的转动没法过缓(如前所述)。

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2、不可逐渐变化有机溶剂的组成,尤其是宣扬相色谱中,也不应必需从溶剂变化为所有是水,相反也是。3、一般说来色谱柱没法后座,仅有经营者表明该柱能够后座时,才能够后座去除返回柱子的残渣。不然后座不容易迅速降低柱效。4、随意选择用于合适的流动性相互之间(特别是在是pH),以避免 同样相互之间被损坏。

有时候能够在入样器前边相接一预柱,剖析柱是键通硅胶时,预柱为硅胶,可使流动性相在转到剖析柱以前事先被硅胶饱和,避免 剖析柱中的硅胶栽培基质被沉定。5、经常用强有机溶剂冲洗色谱柱,清除享有在柱内的残渣。在进行消除时,热对流路系统软件中流动性相的挪动应相互之间混溶的有机溶剂逐渐过渡,每个流动性相的容积不应是柱容积的20倍上下。

下边列举一些色谱柱的消除有机溶剂及次序,做为参考:硅胶柱以正已烷(或庚烷)、二氯甲烷和乙醇依次冲洗,随后再作以忽视次序依次冲洗,全部有机溶剂都必不可少苛刻水解反应。乙醇能清洗残留的强悍旋光性残渣,已烷使硅胶表层新的活性。反相柱以水、乙醇、乙腈、一氯甲烷(或医用乙醚)依次冲洗,再作以忽视次序依次冲洗。假如下一步剖析用的流动性相没有缓冲溶液,那麼能够省去最终自来水冲洗这一步。

四氢呋喃与乙腈或乙醇的混和水溶液能去除脂质。有时候也静脉输液二甲亚砜多次。

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除此之外,用乙腈、甲苯和三氟冰醋酸(0.1%)梯度方向刷洗能去除蛋白环境污染。正离子相互交换柱可用稀碱缓冲溶液冲洗,阳离子相互交换柱可用稀碱缓冲溶液冲洗,去除相互交换特性强悍的盐,随后自来水、乙醇、二氯甲烷(去除导电性在同样相互之间表层的有机化合物)、乙醇、水依次冲洗。

6、存留色谱柱时不可将柱内充满著乙腈或乙醇,柱射频连接器要扭紧,防止有机溶剂融解湿冷。意味著限令将缓冲液返回柱内静放留宿或更为长期。7、色谱柱用于全过程中,假如工作压力提高,一种有可能是产品工件滤片被堵塞,这时候不可更换滤片或将其放进进行消除;另一种有可能是生物大分子转到柱内,使柱子被环境污染;假如柱效降低或色谱仪峰形变,则有可能柱子经常会出现塌陷,杀容积减少。后面二种状况再次出现时,当心扭开柱射频连接器,用清洁小钢将柱子填料放进1-2毫米高宽比(注意把被环境污染填料取净)再作把柱内填料平整。

随后用必需有机溶剂潮湿的同样相互之间(与柱内完全一致)添充色谱柱,铺平,再作扭紧柱射频连接器。那样应急处置后柱效率得到 提升 ,可是难以彻底恢复到新柱的水准。柱头超温一般来说是柱端一部分,在剖析柱前配有一根与剖析柱完全一致同样相的较短柱(5-30mm),能够起着维护保养、减少柱使用寿命的具有。

应用维护保养柱会损害一定的柱效,它是有一点的。一般来说色谱柱使用寿命在精确用于时均值2年之上。以硅胶为栽培基质的填料,不可以在pH2-9范畴内用于。柱头用于一段时间后,有可能有一些吸咐功效强悍的化学物质享有于柱顶,尤其是一些有色板块化学物质更为不容易看清被吸得在柱顶的填料上。

8、新的色谱柱在用于一段时间后柱顶填料有可能塌陷,使柱效升高,这时候也可加补填料使柱效彻底恢复。每一次工作中完后后,最烂用刷洗工作能力强悍的过柱液冲洗,比如ODS柱宜用乙醇冲洗至基准线平衡。当应用盐缓冲液未作流动性相时,用于完后后应用于无盐流动性相互之间冲洗。

没有卤族元素(氟、氯、溴)的化学物质很有可能会锈蚀不锈钢钢管,不可长时间与之了解。配有在HPLC仪上柱头如不经常用于,不可间距4-5天启动冲洗15分钟。


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